目前,细胞冻存常用的技术是液氮冷冻保存法,主要采用加适量?;ぜ恋幕郝涠撤ǘ炒嫦赴?/strong>细胞在不加任何?;ぜ恋那榭鱿轮苯永涠?,细胞内外的水分会很快形成冰晶,从而引起一系列不良反应。
如细胞脱水使局部电解质浓度增高,pH值改变,部分蛋白质由于上述原因而变性,引起细胞内部空间结构紊乱,溶酶体膜由此遭到损伤而释放出溶酶体酶,使细胞内结构成分造成破坏,线粒体肿胀,功能丢失,并造成能量代谢障碍。
胞膜上的类脂蛋白复合体也易破坏引起细胞膜通透性的改变,使细胞内容物丢失。如果细胞内冰晶形成较多,随冷冻温度的降低,冰晶体积膨胀造成细胞核DNA空间构型发生不可逆的损伤,而致细胞死亡。
因此,细胞冷冻技术的关键是尽可能地减少细胞内水分,减少细胞内冰晶的形成。 通常采用甘油或二甲基亚砜(DMSO)作?;ぜ?,这两种物质分子量小,溶解度大,易穿透细胞,可以使冰点下降,提高细胞膜对水的通透性,且对细胞无明显毒性。慢速冷冻方法又可使细胞内的水分渗出细胞外,减少胞内形成冰结晶的机会,从而减少冰晶对细胞的损伤。
B对于药用级、或者免疫细胞等特殊场合的研究中,采用甘油或二甲基亚砜(DMSO)作?;ぜ量赡苋稳徊荒苁褂锰跫?br />
无血清细胞冻存液,通用于人和各种动物细胞株。特别配方(主要成分为DMSO和氨基酸)具有有效提高细胞冻存活率和复苏活力。不含动物来源性蛋白,能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染,确保冻存细胞安全。既适用于一般培养细胞的冻存,也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。